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牛血清白蛋白對(duì)表面的影響離子液體型雙子表面活性劑的性質(zhì)——材料和方法
來源:上海謂載 瀏覽 1827 次 發(fā)布時(shí)間:2021-11-24
2. 材料和方法
2.1. 材料
BSA(96%純度)購自Sigma-Aldrich(批號(hào)A2153),未經(jīng)進(jìn)一步純化即可使用。 我們實(shí)驗(yàn)室根據(jù)文獻(xiàn)合成并純化了離子液體型雙子表面活性劑[C10-4-C10im]Br2。[63]發(fā)現(xiàn)[C10-4-C10im]Br2的臨界膠束濃度(CMC)為4.24 mM,與文獻(xiàn)報(bào)道的一致。[63]所有BSA溶液均在10 mM磷酸鹽緩沖液(pH 7.4)中制備。 在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中使用了雙蒸餾水。 在磷酸鹽緩沖液(pH 7.4)中制備BSA儲(chǔ)備溶液,并通過吸收光譜測(cè)定其濃度。 通過將280 nm處的吸光度除以BSA的摩爾消光系數(shù)(ε280?43890M-1cm-1)來計(jì)算儲(chǔ)備濃度。[64]在水中制備[C10-4-C10im]Br2儲(chǔ)備溶液,并通過在BSA中相應(yīng)添加所需體積的儲(chǔ)備溶液來獲得工作濃度。
2.2. 方法
2.2.1. 表面張力分析
根據(jù)Wilhelmy方法,在DeltaPi-4 Langmuir微張力計(jì)(芬蘭赫爾辛基Kibron)上測(cè)量表面張力。 測(cè)量池的溫度由Grant GD120水恒溫器控制,溫度穩(wěn)定性為±0.02°C。測(cè)量中使用的合金絲(0.51 mm)通過blazer從丁烷氣體中進(jìn)行紅熱燃燒進(jìn)行清潔。 帶有注射口的聚四氟乙烯多孔板用于測(cè)量小的亞相體積(1毫升)。 通過滴定法將[C10-4-C10im]Br2從膠束前到膠束后范圍添加到BSA溶液(5、20和50μM)中。 在三種不同溫度下進(jìn)行表面張力測(cè)量; 298.15、308.15和318.15 K.[C10-4-C10im]Br2的每種濃度下的表面張力通過在一定溫度下分別在水中和不同濃度的BSA溶液中連續(xù)添加[C10-4-C10im]Br2的濃縮溶液來測(cè)量。 為了確定CMC,對(duì)每個(gè)等溫線使用兩個(gè)線性擬合。 第一條線與表面張力線性下降的濃度區(qū)間相吻合,第二條線與表面張力幾乎恒定的濃度區(qū)間相吻合。 CMC由表面張力與對(duì)數(shù)濃度曲線的斷點(diǎn)確定,單個(gè)表面張力讀數(shù)的準(zhǔn)確度約為±0.01mNm-1。
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